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我們經(jīng)?？吹皆S多關(guān)于飲水免疫、滴鼻點(diǎn)眼、噴霧免疫等的文章，而很少見到關(guān)于馬立克疫苗的具體免疫接種方法。這可能是由于它是雛雞第一日齡在孵化廳接種的原因，也可能是雞群發(fā)病后大多認(rèn)為雞舍消毒不徹底造成的早期感染或雞群之間的水平傳播引起的，這樣往往忽視了馬立克疫苗接種的重要性。
我們知道馬立克疫苗品質(zhì)、解凍稀釋及接種過程、注射器材的消毒方式等都會影響接種效果。在生產(chǎn)中接種雞群暴發(fā)馬立克疾病的最常見因素為對雛雞注射前的準(zhǔn)備工作、疫苗混合及處理方式不當(dāng)。下面我們詳細(xì)介紹各種注意細(xì)節(jié)，以引起同行的關(guān)注。
1、影響疫苗效價(jià)的因素
疫苗從取出、解凍到與稀釋液的混合，整個(gè)過程最好在1分鐘內(nèi)完成，切記不能超過2分鐘，否則會致使疫苗效價(jià)完全喪失。所以每次從液氮罐中取疫苗時(shí)，只能取出立刻要用的一瓶，其他疫苗都必須立即全部再放回液氮罐中。
1.1、解凍疫苗的水溫對疫苗效價(jià)有直接影響
水溫在25℃時(shí)，疫苗效價(jià)最高100%，當(dāng)水溫達(dá)到40℃時(shí)，效價(jià)降低到75%，如果水溫降低至18℃時(shí)效價(jià)為80%。所以，我們建議當(dāng)疫苗從液氮中取出后，應(yīng)立即放入適當(dāng)?shù)乃疁兀?8℃~25℃）來加以解凍。
1.2、在水中解凍時(shí)放置時(shí)間對疫苗效價(jià)的影響
在水中放置30秒，疫苗效價(jià)最高100%,放置5分鐘后效價(jià)降低到83%，放置10分鐘疫苗效價(jià)降低為68%，放置15分鐘降到47%，由此可見隨著時(shí)間的延長疫苗效價(jià)迅速降低。
1.3、稀釋液的溫度對疫苗效價(jià)也會產(chǎn)生影響
稀釋液保存在室溫條件下，稀釋疫苗后效價(jià)最高100%，如果使用冷凍過的稀釋液（4℃），疫苗效價(jià)僅為78%，所以稀釋液應(yīng)當(dāng)隨時(shí)維持在室溫（18℃~25℃）用于混合疫苗，絕對不可以先冷凍。
1.4、疫苗中添加抗生素
許多孵化場為了防控雛雞早期感染細(xì)菌，就在雛雞出場前注射一針抗生素。一般為了節(jié)省人工將抗生素加到馬立克疫苗中一起注射進(jìn)去，殊不知有許多種抗生素都對疫苗中的病毒有害，即使是未完全破壞疫苗，所以添加抗生素時(shí)應(yīng)慎之又慎。
2、稀釋疫苗的操作
2.1、所用工具
每次稀釋疫苗時(shí)都應(yīng)用全新的塑膠無菌針管和18G/1.5″針頭，以便將安瓶中的疫苗吸取并注入稀釋液中。同時(shí)馬立克疫苗是活細(xì)胞苗如果用其他型號的針頭會破壞病毒的細(xì)胞壁影響疫苗效價(jià)。且不能重復(fù)使用一個(gè)針頭，甚至用生銹的針頭，否則疫苗會被污染。建議一定要用靜脈注射的成套裝置來稀釋馬立克疫苗，針頭從下面扎入瓶內(nèi)，這樣氣泡逐漸往上走，對疫苗稀釋液起到攪拌作用，會提高疫苗免疫效果。
2.2、操作規(guī)程
首先抽取少量的稀釋液到針管中，用于洗滌安瓶，然后抽取稀釋液注入安瓶將疫苗稀釋后再抽出來注入整瓶稀釋液中，上述過程至少要重復(fù)2~3次，這樣才能將安瓶中剩余的14%疫苗病毒回收起來。吸取疫苗的動作和混合過程應(yīng)溫和、輕柔，以免疫苗病毒的細(xì)胞壁受到破壞。從疫苗混合到接種完畢，最好在30分鐘內(nèi)完成，這樣可保留9%的疫苗效價(jià)免受損失。
3、注射器材的消毒
注射器應(yīng)放在干凈而隔離的地方，不能與不潔的物品或表面接觸，避免潮濕和污染。應(yīng)經(jīng)常檢查連續(xù)注射器是否有漏水，尤其是注射器潴留底板的鈕附近是否會漏水。
3.1、檢查接種是否正確
許多孵化廳均利用色素或是稀釋液中的顏色來檢查，即小雞注射部位的絨毛是否有被著色，如果有顏色就說明接種不恰當(dāng)、疫苗外漏，這種檢查法也可應(yīng)用于少量的雞群(100~200只)，來評估接種失誤的比率是多少。如果靠近接種點(diǎn)的雛雞絨毛是濕的，就表示對這只雛雞沒有恰當(dāng)?shù)慕臃N到位。
3.2、注射器的清洗及殺菌
每次接種完畢后應(yīng)立刻用清水沖洗注射器材，然后分解注射器的所有組成零件，將其浸泡在盤中,并用中性的清潔劑熱水溶液清洗。最后取出注射器再用干凈的熱水沖洗2遍，以便除去所有殘留的清潔劑。
注射器在滅菌前應(yīng)用鋁鉑紙輕輕的包好。注射器材應(yīng)在高溫高壓滅菌鍋中滅菌20~30分鐘。我們有時(shí)采用高壓快鍋來滅菌，高壓鍋中的水應(yīng)和滅菌托盤至少相隔4厘米，這樣器材就是在蒸氣中蒸而不是在滾水中煮了，使用這種高壓快鍋應(yīng)延長滅菌時(shí)間到60分鐘為宜。
3.3、注射器的檢查
每2周或注射20萬只雛雞后應(yīng)將所有的彈簧、閥珠及墊圈等加以更換，我們不能為了省事或節(jié)約成本就忽略此項(xiàng)工作，要知道時(shí)常更換新的零件是很重要的，因?yàn)榭梢员苊庖呙绲穆┦?，進(jìn)一步可以防止疫苗遭受污染。
4、雛雞的存放
馬立克病毒的主要傳播媒介是上批雞群的毛囊及絨毛屑，如果雛雞接種馬立克疫苗后直接存放在有馬立克病毒的地方，那么疫苗接種效果可能只有30%~40%。因此應(yīng)將雛雞放在一個(gè)干凈的環(huán)境中，尤其應(yīng)引起注意的是雛雞舍必須徹底清洗消毒，以避免雛雞受到野毒的感染。雛雞越晚接觸野外病毒，其疫苗的保護(hù)力越好。因?yàn)閴|料的徹底消毒很難做到，建議雛雞入舍時(shí)最好鋪設(shè)墊紙，這樣可以推遲雛雞和墊料的接觸時(shí)間，大大降低感染馬立克的機(jī)率
。
5、蛋內(nèi)接種
蛋內(nèi)接種在美國的90年代開始并流行,在其他國家沒有普及。蛋內(nèi)接種與1日齡皮下接種的成本大致相同，它主要節(jié)省在人力資源上。而1日齡接種比蛋內(nèi)接種較準(zhǔn)確。蛋內(nèi)接種一般是對18天的胚胎接種, 每枚種蛋只注射0.05毫升,并且只可以接種MD/IBD細(xì)胞結(jié)合疫苗，如果接種凍干MD疫苗無效。
在進(jìn)行蛋內(nèi)接種時(shí)應(yīng)注意以下事項(xiàng)：維護(hù)機(jī)器正常運(yùn)行和保養(yǎng)，因?yàn)闄C(jī)器上面管子較多，有一條或幾條出錯(cuò)，哪怕是松動了都會出現(xiàn)較大問題。同時(shí)種蛋應(yīng)大頭朝下放在蛋盤上，否則機(jī)器會錯(cuò)位而影響孵化率。調(diào)整好種蛋室的溫度和濕度，這樣雖然種蛋在孵化器外面的時(shí)間延長了，但不會受涼，從而保證了較高的孵化率。
在蛋內(nèi)接種過程中應(yīng)不斷搖動疫苗瓶，以保持細(xì)胞苗混合均勻。由于馬立克疫苗是細(xì)胞苗，容易受到外界環(huán)境變化的影響，而致使疫苗效力下降。所以我們在接種過程中嚴(yán)格按照規(guī)程來小心操作，切記給疫苗瓶配備保溫裝置，確保疫苗效價(jià)不受影響。